Prinzip des MicroAmes1-Tests

Das MacroAmes1-Kit enthält Reagenzien für den bakteriellen Rückmutationstest: Im Histidin-Operon (Salmonella typhimurium) wurden Punktmutationen vorgenommen, die das Bakterium unfähig machen, die entsprechende Aminosäure zu produzieren. Diese Mutationen führen zu Organismen, die nicht wachsen können, wenn ihnen kein Histidin zugeführt wird.

Das mutagene Potenzial einer Testprobe wird ermittelt, indem man diese Organismen, die Aminosäuren benötigen, unterschiedlichen Konzentrationen der Probe aussetzt und nach dem Reversionsereignis selektiert. Für diese Selektion werden Medien verwendet, denen die spezifische Aminosäure fehlt, so dass nur die Zellen überleben und wachsen können, die die Reversion zur Histidin-Prototrophie durchlaufen haben. Ein mutagenes Ereignis, das Basensubstitutionen oder Frameshifts innerhalb des Gens verursacht, kann eine Reversion zur Aminosäureprototrophie auslösen. Diese umgewandelten Bakterien wachsen dann in Medien mit Histidinmangel, während nicht umgewandelte Bakterien nicht wachsen können.

Bei den in diesem Kit enthaltenen Stämmen handelt es sich um den Salmonella typhimurium-Stamm TA98, der für den Nachweis von Frameshift-Mutationen geeignet ist, und um den Stamm TA100, der Basenpaar-Substitutionen nachweist.